真菌的營養要求不向。在一般細菌培養基上均能生長。真菌培養及鑑定有哪些的呢?本文是小編整理真菌培養及鑑定的資料，僅供參考。
1.採集標本 體表真菌的標本有毛髮、皮屑、甲屑、痂等，標本在分離前常先用75%的乙醇消毒。深部真菌的標本可根據情況取痰、尿液、糞便、膿液、口腔或陰-道分泌物、血液、腦脊液、各種穿刺液和活檢組織，採集標本應注意無菌操作。
2.培養檢查：可提高真菌檢出率，並能確定菌種。標本接種於葡萄糖蛋白腖瓊脂培養基(Sabouraud agar)上，置室溫或37℃培養1～3周。必要時可行小培養協助鑑定。菌種鑑定常根據菌落的形態及顯微鏡下形態判斷。對某些真菌，有時尚需配合其他鑑別培養基、生化反應、分子生物學方法確定。
真菌培養的方法與直接鏡檢法相比較而言，更能對大部分真菌感染的灰指甲作出準確的鑑定，也是診斷灰指甲的一個很重要的手段。下面我們就從培養基的選擇、培養時間、菌種鑑定三方面來了解一下灰指甲的真菌培養法。
1.培養基的選擇
通常培養真菌會同時選用兩種培養基，如果單用一種培養基，則容易忽略其它種類的真菌診斷。常見的兩種培養基，一種為沙氏葡萄糖瓊脂培養基中加抗菌劑，常為氯黴素和放線菌酮;另一種是沙氏葡萄糖瓊脂培養基中僅加氯黴素，不加放線菌酮。
2.培養時間
各種真菌的生長速度不同，所以報告的時間也不同。一般面板癬菌生長較緩慢，在26℃-28℃的環境下需要培養2-4周才能發報告，但是，面板癬菌含蓋的菌種較多也需要區別對待;酵母菌生長較快，通常2-3就可以發報告，如果為陰性則需要觀察1周;黴菌生長也比較快，一般2-4天就可以發報告。
3.菌種鑑定
(1)絲狀真菌：包括面板癬菌和黴菌，根據菌落形成所需要的時間，在不同條件下生長的情況，菌落表面及背面的形態、色素，培養基中有無色素，培養物用乳酚棉藍染色後鏡檢找特徵性標誌結構。(2)酵母菌：分為形態學鑑定及生化試驗。形態學鑑定主要觀察有無假菌絲產生，如有則為念珠菌屬，如無則為念珠菌以外的酵母菌;生化試驗最為常用的是API系統，用此法鑑定準確，但價格較貴。
)絲狀真菌：主要是形態學的鑑定，如直接塗片觀察，小培養顯微鏡鑑定，誘導形態觀察(25℃與35℃下雙相型真菌的特徵孢子及菌絲的.產生和兩種菌落的形成及腦心浸液瓊脂培養基，KT培養基，KelleyAgar培養基轉相誘導，另外常用的還有面板癬菌VB1生長刺激，吳氏熒光檢查，毛髮穿孔試驗及在特殊情況下進行的一些生化鑑定等。其中，小培養顯微鏡檢對於絲狀真菌的鑑定，特點是動態直觀，易於觀察，且節約材料。解放軍總醫院第一附屬醫院面板科馬天
(2)酵母菌鑑定：形態學鑑定主要是玉米吐溫誘導下特徵菌絲及特徵孢子的檢驗，血清芽管形成，而在形態學基礎上還必須進行生化鑑定：有標準鑑定，自動儀器鑑定，顯色鑑定，其中，自動儀器鑑定(如API20C，ID32C等)，顯色鑑定對於酵母樣真菌的鑑定，特點是快速簡便;標準鑑定是按傳統雙歧表流程鑑定(包括糖同化試驗，糖發酵試驗，CAFC酚氧化酶試驗，尿酶試驗，KNO3同化試驗，脂肪酸需求試驗)，是真菌鑑定的金標準，系統準確，缺點是程式繁瑣，耗時長，與臨床治療不太適應。此外，還有血清學玻片凝集試驗，動物致病性實驗，分子生物學鑑定：如核酸雜交，DNA探針雜交，PCR擴增序列分析，PCR-SSCP單鏈構象多型性分析，PCR-RFLP限制性片段長度多型性分析，PCR-RAPD隨機擴增多型性分析，PFCG脈衝電泳核型分析等。
對於酵母樣真菌首選CHROMagar念珠菌顯色培養基，而顯色培養基不能鑑定的酵母樣真菌可採用自動儀器YBC卡進行鑑定或API板;條件較差的實驗室可採用傳統標準鑑定法中鑑定值較高的試驗，如酚氧化酶鑑定新型隱球菌(+)，尿素區分毛孢子菌屬(+)，地絲菌屬(-)，念珠菌屬(-)(克柔念珠菌/溶脂念珠菌+)，球擬酵母屬(-)，隱球菌屬(+)，玉米-土溫培養基上產菌絲區分念珠菌屬(+)與球擬酵母屬(-)，隱球菌屬(-)與毛孢子菌屬(+)，地絲菌屬(+)。而同化試驗推薦平皿法，一個平皿內可觀察多種糖類的同化情況，且結果易於觀察，重複性好。對於絲狀真菌及雙相型真菌，可採用小培養法，快速簡便易於觀察。而對於雙相型真菌還須經過腦心浸液培養基轉相試驗後確證。而血清學及分子生物學則主要用於流行病學和一些難培養難鑑定真菌的檢驗，由於成本高或要求技術難度較高，故而不適合在常規工作中採
真菌的培養特性真菌的營養要求不向。在一般細菌培養基上均能生長。檢查時常用沙保培養基。此培養基成分簡單，主要含有1%蛋白陳、4%葡萄糖和2%瓊脂，pH佰55.面板癬拘在此培養基上生長較慢，常需1～4周;世腐生性真構在此培養基上生長迅速。故分離真菌時常在此培養基戶加一定量的放線菌酮和氯黴素，前者用於抑制汙染真菌，後者用於抑制細慚的生長。有些病原性真菌，如白假絲酵球菌、組織腦漿茵、新生隱球菌竿加放線菌酮即不能生良，故宜用力抗生京的血瓊脂平板，見有生長後移種沙保培養基，並問時做玻片培養以觀察其自然狀態下的形態結構。 培養真菌最適宜的酸鹼度是PH值4.0～6.0，淺部感染真菌的最道溫度為22～28℃，但某些誅部感染真菌一般在37℃牛長最好。培養真菌需較尚的溼度與氧。
真菌的培養方法玻片培養又稱小培養，小培養法可以隨時觀察真菌的生長形態(如大分生孢子、小分生孢子及孢子柄等)，還可以隨時觀察其生長髮育的全部情況，有利於菌種的鑑定。
1、鋼環法
(1)材料：白假絲酵母菌、沙保弱培養基、無菌玻片、蓋玻片、鋼環(帶有缺 口)、石蠟。
(2)方法
①用無菌鑷子取無菌小培養鋼環，環的兩面分別蘸取熔化的固體石蠟，平置於無菌載玻片上，另取一無菌蓋玻片，在酒精燈火焰上加熱後覆蓋於鋼環上，待冷後，小培養鋼圈即被固定於載玻片與蓋玻片之間。
②用毛細滴管吸取融化的培養基，從鋼環上端孔注入，注入量佔容積的1/2即可。
③培養基冷卻凝固後，用接種針挑取材料，由上端孔接種於環內培養基上。
④置溼盒內，室溫或37℃下培養2—3d後，逐日觀察，鏡下可連續看到真菌生長過程及菌絲、孢子等特徵，一般7d左右即可長好。
⑤也可不用小培養鋼環，直接將融化的培養基滴於無菌玻片上，待冷凝後從周邊接種材料，用蓋玻片覆蓋後培養，在顯微鏡下連續觀察生長情況。
(3)結果：鏡下觀察可見到有胞壁增厚的厚膜孢子及假菌絲。
2、小塊瓊脂玻片培養法
用無菌操作法將制好的待用瓊脂平板用無菌接種針或接種環切成大約1cm2的方塊，將其放置於滅菌的載玻片上。將標本或待檢菌接種於瓊脂塊四周邊緣靠上方部位，然後用無菌鑷子取一無菌的蓋玻片蓋在瓊脂上。在無菌平皿內放入少量無菌水和一個無菌U形(或V形)玻璃棒。將此載玻片置於玻璃棒上，蓋上平皿蓋培養。每日用肉眼和顯微鏡觀察孢子和菌絲的特點。
