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檢驗技師檢驗資料:血塗片製備與染色

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血塗片是通過特定的方法將血液按一定方向均勻塗開的過程,微觀上使細胞是由球形變為平面形或近平面形平鋪在載玻片上。血塗片的顯微鏡檢查是血液細胞形態學檢查的基本步驟,特別是對於各種血液病的診斷和鑑別診斷,具有重要價值。血塗片製備是否合格、染色的好壞直接關係到檢驗結果的質量。

檢驗技師檢驗資料:血塗片製備與染色

  (一)血塗片製備

1.載玻片的準備

新載玻片常帶有遊離鹼質,須用濃度為lmol/L的HCl浸泡24h,再用清水徹底沖洗,乾燥後備用。舊載玻片要用含洗滌劑的清水中煮沸20min,洗掉血膜,再用清水反覆沖洗,最後用0.95L/L乙醇浸泡1h,乾燥備用。

使用載玻片時,不要用手觸及玻片表面,保持玻片清潔、乾燥、中性、無油膩。

2.血塗片製作方法

取血液標本一滴置載玻片的一端,以邊緣平滑的推片一端,從血滴前沿方向接觸血液,使血液沿推片散開,推片與載玻片保持30~45○夾角,平穩地向前推動,血液即在載玻片上形成薄層血膜。

塗片的厚薄與血滴大小、推片與載玻片之間的角度、推片時的速度及血細胞比容有關。血滴大、角度大、速度快則血膜越厚;反之則血膜越薄。

一張良好的血塗片,要求厚薄適宜,頭體尾明顯,細胞分佈均勻,血膜邊緣整齊並留有的空隙。

  (二)血塗片染色

染色的目的是使細胞的主要結構,如細胞膜、細胞質、細胞核等染上不同的`顏色,以便於鏡下觀察識別。

血塗片染色包括兩個過程:固定和染色。固定是將細胞蛋白質和多糖等成分迅速交聯凝固,以保持細胞原有形態結構不發生變化。常用的染色方法有瑞特染色法(Wright)、姬姆薩染色法(Giemsa)等。

1.瑞特(Wright)染色法

本法的特點是將固定和染色合併在一起進行,手續簡便,染色時間短,對白細胞特異性顆粒著色較好,但對核的著色略差。

2.姬姆薩(Giemsa)染色法姬姆薩染料由天青和酸性染料伊紅組成的複合染料。染色原理、緩衝液與瑞特染色法大致相同。本法對細胞核結構和寄生蟲著色較好,結構顯示更為清晰,但細胞質和顆粒著色較差。

3.瑞-姬染色法

瑞特染色液和姬姆薩染色液對細胞進行染色時有各自的顯色特徵,前者對細胞漿和顆粒著色較好,後者對對細胞核結構顯示清晰。因此將瑞特染料和姬姆薩染料混合,甲醇溶解後組成瑞-姬染色液能取長補短,優勢互補,其中所使用的緩衝液與瑞特染色法相同。用該混合染液對血細胞進行染色,細胞核、細胞漿和細胞內顆粒著色均有上佳表現,著色鮮豔,對比鮮明,是臨床上廣泛使用的方法。