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鏈球菌屬及其檢驗「微生物檢驗」

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鏈球菌屬(Streptococcus)細菌,呈鏈狀排列的革蘭陽性球菌,個別種成雙排列。廣泛分佈於自然界、人及動物腸道和健康人鼻咽部,大多數不致病,致病菌可引起各種化膿性炎症、猩紅熱、新生兒敗血症、細菌性心內膜炎以及風溼熱、腎小球腎炎等超敏反應性疾病。下面是yjbys小編為大家帶來的關於鏈球菌屬細菌的知識,歡迎閱讀。

鏈球菌屬及其檢驗「微生物檢驗」

  ⒈分類

鏈球菌的分類方法尚未統一。常用下列兩種方法。

⑴根據溶血現象:分為3類。

①甲型溶血性鏈球菌(α-hemolytic streptococcus):菌落周圍有1~2mm寬的草綠色溶血環,稱甲型溶血或α溶血,該類菌又稱草綠色鏈球菌,為條件致病菌。

②乙型溶血性鏈球菌(β-hemolytic streptococcus):菌落周圍有2~4mm寬的透明溶血環,稱乙型溶血或β溶血,該類菌又稱溶血性鏈球菌,致病性強,常引起人和動物多種疾病。

③丙型鏈球菌(γ-streptococcus):菌落周圍無溶血環,因而又稱不溶血性鏈球菌,一般不致病。

⑵根據抗原結構:按鏈球菌細胞壁中多糖抗原不同,可分成A、B、C、D …等20個群。同群鏈球菌間,因表面蛋白質抗原不同又分若干型。如A群根據其M抗原不同,可分成約100個型;B群分4個型。對人致病的鏈球菌菌株,主要是 A群,多數呈現乙型溶血。

  ⒉細菌特性

  ⑴鏈球菌

① 形態染色 球形或橢圓形,直徑0.5~1.0μm,鏈狀排列,鏈的長短與細菌的種類和生長環境有關,在液體培養基中形成的鏈較長。無芽胞,無鞭毛。多數菌株在培養早期(2~4h)形成透明質酸的莢膜。革蘭染色陽性。

②分離培養 營養要求較高,培養基中需加入血液或血清、葡萄糖、氨基酸、維生素等物質。多數菌株兼性厭氧,少數為專性厭氧。在液體培養基中呈沉澱生長,在血平板上,37℃18~24h後可形成灰白色、圓形、凸起、光滑、直徑為0.5mm~0.75mm的細小菌落,菌落周圍出現不同型別的溶血環。

③生化反應 觸酶陰性、一般不分解菊糖,不被膽汁溶解,這兩特性可用來鑑別甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌。

④抗原構造 主要有三種:

蛋白質抗原:或稱表面抗原。具型特異性有M、T、R、S 4種,位於C抗原外層。與致病性有關的是M抗原。

多糖抗原:或稱C抗原。為群特異性抗原,位於細胞壁。根據C抗原的不同,將鏈球菌分為20群。對人致病的90%屬A群。

核蛋白抗原:或稱P抗原。無特異性,為各種鏈球菌所共有,並與葡萄球菌有交叉。

⑤抵抗力 不強,60℃30min即被殺死。對常用消毒劑敏感。乙型鏈球菌對青黴素、紅黴素、四環素及磺胺類敏感。

  ⑵ 肺炎鏈球菌

① 形態染色 革蘭陽性球菌,菌體呈矛頭狀、成雙排列,寬端相對,尖端向外,在膿液、痰液及肺組織病變中亦可呈短鏈狀,無鞭毛,無芽胞,在機體內或含血清的培養基中可形成莢膜。

②分離培養 營養要求高,在血平板上形成灰白色、圓形、直徑為0.5mm~1.0mm的扁平菌落,周圍有草綠色溶血環。培養時間長時可產生自溶酶。

③生化反應 多數菌株分解菊糖,膽鹽溶解試驗陽性和optochin敏感試驗陽性,籍此可與草綠色鏈球菌相區別。

④抗原結構

莢膜多糖抗原 可將肺炎鏈球菌分為85個血清型。肺炎鏈球菌14型與人類A血型抗原有交叉反應。

多糖抗原 為各型菌株所共有。可被血清中一種C反應蛋白(C reactive protein,CRP)所沉澱。正常人血清中只含微量CRP,急性炎症者含量增高,故常以測定CRP作為診斷的依據。 檢驗地帶網

M蛋白:為型特異抗原,與A群鏈球菌M蛋白類似,但抗原性不同,與毒力無關。

⑤抵抗力 本菌抵抗力弱,對一般消毒劑敏感。有莢膜菌株抗乾燥力較強,在幹痰中可存活1~2月。對青黴素、紅黴素、潔黴素敏感。

⑥ 變異性 有莢膜的肺炎鏈球菌經人工培養後可發生菌落由光滑型向粗糙型,即S-R變異,同時隨著莢膜的'消失,毒力亦隨之減弱。將R型菌落的菌株接種動物或在血清肉湯中培養,則又可恢復S型。

  ⒊臨床意義

  ⑴化膿性鏈球菌

A群鏈球菌也稱化膿性鏈球菌(pyogenic streptococcus),致病力強,占人類鏈球菌感染的90%,能產生多種外毒素和侵襲性酶,如鏈球菌溶素O和S、M蛋白、脂磷壁酸、鏈激酶、鏈道酶、透明質酸酶等,可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、膿皰病、軟組織感染、心內膜炎、腦膜炎及變態反應性疾病如急性腎小球腎炎、風溼熱等,產毒株還可引起猩紅熱。鏈球菌型別多,各型間無交叉免疫,故常反覆感染。

  ⑵乳鏈球菌

B群鏈球菌學名無乳鏈球菌(actiae)是新生兒敗血症和腦膜炎的常見菌,對成人主要引起腎盂腎炎、子宮內膜炎等。

  ⑶ 肺炎鏈球菌

肺炎鏈球菌(moniae),俗稱肺炎球菌(pneumococcus),是大葉性肺炎、支氣管炎的病原菌,還可引起中耳炎、乳突炎、鼻竇炎、腦膜炎等。其莢膜在細菌的侵襲力上有重要作用,此外溶血素、神經氨酸酶是主要致病物質。感染後機體可產生牢固的型特異性免疫。但因菌型多,可再感染其他型。 檢驗地帶網

  ⑷ 草綠色鏈球菌

草綠色鏈球菌亦稱甲型溶血性鏈球菌。是人體口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群,可引起亞急性細菌性心內膜炎。

  ⒋微生物學檢驗

  ⑴鏈球菌

檢驗程式

鏈球菌檢驗程式見圖9-2。

⑵標本採集 根據不同疾病採集不同標本。

⑶檢驗方法

顯微鏡檢查 標本塗片革蘭染色,鏡檢見鏈狀排列革蘭陽性球菌可初報。

分離培養 血液標本先增菌培養,膿液、咽拭可接種血瓊脂平板並塗片染色鏡檢,初代分離需5%C02,35℃24h觀察菌落性狀。

  ⑵肺炎鏈球菌

①檢驗程式

②標本採集 根據病變部位採集不同標本。 檢驗地帶網

③檢驗方法

顯微鏡檢查: 除血液外,痰、膿液等均可直接塗片染色鏡檢。如發現革蘭陽性矛頭狀雙球菌,周圍有較寬的透明區,經莢膜染色確認後可初報“找到肺炎鏈球菌”。

分離培養:血液、腦脊液先增菌,可呈均勻混濁,有綠色熒光。痰液、膿液可直接接種血平板,5%~10%CO2培養後,取可疑菌落進一步作optochin敏感實驗、膽鹽溶菌試驗與菊糖發酵試驗,以區別於甲型鏈球菌。

動物試驗:小鼠對肺炎鏈球菌敏感,12~36h死亡。

莢膜腫脹試驗:如遇同型免疫血清,則肺炎鏈球菌莢膜出現腫脹,為陽性。

④鑑定與鑑別

①Lancefield群特異性抗原鑑定:B群為無乳鏈球菌,F群為米勒鏈球菌,A、C、G群抗原不是種特異性抗原,還需根據菌落大小和生化反應進一步鑑定。

②PYR試驗:化膿性鏈球菌為陽性。

③桿菌肽(bacitracin)敏感試驗:化膿性鏈球菌為陽性,有別於其他PYR陽性的β溶血性細菌(豬鏈球菌、海豚鏈球菌)和A群小菌落β溶血性鏈球菌(米勒鏈球菌)。此法可作為篩選試驗。

④VP試驗:可鑑別A、C、G群β溶血的大、小兩種不同菌落。

⑤CAMP試驗:無乳鏈球菌能產生CAMP因子,它可促進金黃色葡萄球菌溶血能力,使其產生顯著的協同溶血作用。試驗時先將金黃色葡萄球菌(ATCC25923),沿直徑劃線接種,再沿該線垂直方向接種無乳鏈球菌,兩線不得相接,間隔約3~4mm。35℃孵育過夜,兩種劃線交界處出現箭頭狀溶血,即為陽性反應。本法可作為無乳鏈球菌的初步鑑定試驗。