(1)軟瓊脂的配製：含有20%NCS(小牛血清)的.2倍濃縮的RPMI1640.
①1%瓊脂水溶液：高壓滅菌，42℃預熱。
②0.5%瓊脂：由1份1%瓊脂加1份含20%小牛血清的2倍濃縮的RPMI1640配製而成。置42℃保溫。
(2)用上述0.5%瓊脂液(含有飼養細胞)15ml傾注於直徑為9cm的平皿中，在室溫中待凝固後作為基底層備用。
(3)按100/ml，500/ml或5000/ml等濃度配製需克隆的細胞懸液。
(4)1ml 0.5%瓊脂液(42℃預熱)在室溫中分別與1ml不同濃度的細胞懸液相混合。
(5)混勻後立傾注於瓊脂基底層上，在室溫中10min，使其凝固，孵育於37℃、5%CO2孵箱中。
(6)4～5天 後即可見針尖大小白色克隆，7～10天后，直接移種至含飼養細胞的24孔中進行k1nz-0.html" target="_blank" >培養。
(7)檢測抗體，擴大培養，必要是地再克隆化。
