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臨床生化檢驗中常見問題彙總

檢驗技師和技士 閱讀(2.26W)

你知道什麼是臨床生化檢驗嗎?你對臨床生化檢驗瞭解嗎?下面是yjbys小編為大家帶來的關於臨床生化檢驗中常見問題的知識,歡迎閱讀。

臨床生化檢驗中常見問題彙總
  一、導致生化專案校準結果不良的因素

  1、儀器方面

(1)光源燈老化導致儀器發光不穩定造成酶類試驗專案重複性不良;

(2)孵育系統髒汙產生的隨機誤差;

(3)比色杯髒汙、劃痕引起外來干擾;

(4)試劑針、樣品針及其密封墊老化造成加樣不準引起校準結果不良;

(5)清洗機構滴水或堵塞造成交叉汙染引起結果不良。

  2、試劑方面

(1)試劑劣化引起試劑空白吸光度值變化而造成試劑反應效能不良;

(2)校準品失效引起校準結果靈敏度喪失—標示值和實際值之間的吸光度存在差距。

  3、引數方面

引數設定不合理或者錯誤。

  二、生化專案測試結果不良的具體情況分析

當出現測試結果不良的情況時,首先要分析是所有專案結果不良還是個別項目結果不良;結果不良的專案是否存在規律性;是採用速率法還是終點法分析的專案;是採用單試劑的還是雙試劑的專案。然後再做針對性的進一步分析:

  1、由光路因素造成的結果不良。

現象:速率法酶類專案(主波長340nm)結果混亂。

原因分析:(1)燈泡老化;(2)反應槽髒汙;(3)水質太差;(4)比色杯髒汙;(5)比色杯破損;(6)光窗脫落滲水。

  2、由加樣系統故障造成的結果不良。

現象:結果偏低或高,或為零,或為負值。

原因分析:(1)樣品針(試劑針)髒汙堵塞;(2)水平相對位置有偏移導致加樣不準;(3)注射器密封性不良有氣泡;(4)管路漏氣;(5)脫氣部分不良;(6)樣品針高度不合適會引起SAMPLESH0T的報警;(7)樣品針高度不夠,採集不到樣品,引起專案結果為零或負值。

  3、由試劑因素造成的結果不良。

原因分析:(1)試劑變質失效將會使反應曲線不良;(2)試劑間存在交叉汙染也會造成測試結果不良;(3)此外,還要檢查在更換試劑後,測光點、反應方向、上下界線等引數的設定是否正確。

  4、由攪拌棒造成的結果不良。

原因分析:(1)如果單試劑的專案結果不良,攪拌棒1可能有問題;(2)如果雙試劑的專案結果不良,攪拌棒1和2都可能有問題;(3)當攪拌棒位置偏移或旋轉不良,導致反應不充分,也會造成結果不良。

  5、由清洗機構造成的結果不良。

原因分析:(1)管路真空不良致使廢液吸不乾淨造成結果不良;(2)管路堵塞後造成管路滴水、溢水也會導致結果混亂。

  三、全自動生化儀雙試劑專案中出現R1、R2液不能匹配的原因分析

雙試劑專案一段時間做下來後,試劑盒中就會出現R1與R2不能匹配情況,原因是加試劑時試劑針都有附加餘量,而且隨加的試劑量不同,附加餘量也不同;以日立儀器為例,在日立生化儀(如7060)操作手冊上有個關於“為防止試劑被稀釋,在每次吸取試劑時再吸取一定的餘量加在設定量上”的表格如下:

試劑設定量(μl)

50

100

150

200

250

300

350

附加餘量(μl)

13

16

19

23

26

29

32

舉個例子,做ALT專案,反應試劑引數,R2為50μl,R1為200μl,R2:R1=1:4

日立7060生化儀實際做時R2要吸掉63μl,R1吸掉223μl,R2:R1=1:3.54,這個吸樣比例與實際需要的比例(試劑盒標示的比例)失衡!時間一久,就會造成R2已經用完而R1還剩餘很多的情況。

  四、生化檢測過程中引起交叉汙染的原因分類

交叉汙染是生化儀使用中常見的現象,簡單理解為在A專案測定中所使用的試劑、樣本、反應產物、清洗劑等對B專案的測定產生了不良影響的現象,A專案和B專案不一定是相鄰專案。

交叉汙染具體型別可分為:(1)樣本針攜帶汙染;(2)試劑針攜帶汙染;(3)攪拌棒攜帶汙染;(4)清洗系統攜帶汙染;(5)比色杯汙染。

  五、特別針對CKMB/CK升高或倒置的原因簡析

在臨床實驗中偶爾會遇到個別臨床標本其CKMB的檢測結果與CK的結果不相符,CK的結果在正常範圍,而CKMB的檢測結果卻明顯偏高,甚至出現CKMB的結果大於CK的現象,分析原因如下:

1、試劑因素,主要表現為試劑汙染或使用已過有效期的試劑。

2、儀器因素,市面上CKMB的校準品或質控品較少見,而且其價格也較其他酶類校準品高得多。因此,一般醫院都未使用CKMB校準品和質控品,而是採用廠家試劑盒使用說明書提供的理論因素,在理論因素設定時,不同儀器略有差異。

3、方法學因素,肌酸激酶CK是由B、M兩種不同亞基組成的二聚體,所以CK有三種同工酶即CKMM、CKMB、CKBB。CKBB主要存在於腦組織、胃腸道及子宮平滑肌中,腦組織中幾乎全為CKBB,CKMB主要存在於心肌組織中,CKMM主要存在於骨骼肌組織中。在正常人血清中幾乎無CKBB或極微量。理論上CKMB的活性是不可能大於CK活性的。

目前常用的檢測CKMB的'方法是免疫抑制法,出現CKMB>CK的情況就是可能由這種方法的檢測原理造成的。在人體中正常情況下CKBB很少,可忽略,而免疫抑制法就是建立在忽略CKBB的基礎上的。即用抗CKM單體的抗體將M亞基完全抑制,所以CKMM會失去活性,而CKMB活性會失去一半,這樣測出的活性實際就是CKMB的一半,所以CKMB的活性應該為測定的2倍。但如果存在CKBB就會使結果偏高,即測定的CKMB活性= CKMB+2CKBB。如果CKBB>CKMM,由於結果要乘2,也就是說2CKBB+CKMB>CKBB+CKMB+CKMM,即測得的CKMB活性>CK活性。

4、溶血因素,因紅細胞內含有大量的腺苷酸激酶(AK)從而催化ADP反應生成ATP而引起NADPH的吸光度的改變,使CK和CKMB測定結果假性偏高。CKMB是CK-B×2,假性偏高較CKMM更明顯,同時CKMB參考範圍較小,可能出現CKMB大於CK或CK結果在正常範圍內,而CKMB結果卻明顯偏高。

5、隨機誤差,如吸到小氣泡等。