1.除了高溫加熱以外，其他滅菌方法還有( )
A.長時間紫外線照射 B.真空包裝
C.用保鮮膜密閉 D.新增防腐劑
2.下列關於微生物分離和培養的敘述，錯誤的是( )
A.微生物培養前，需對培養基進行消毒
B.測定土壤樣品中的細菌數目，常用菌落計數法
C.分離土壤中不同的微生物，要採用不同的稀釋度
D.分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養基中唯一的氮源
3.(2015·鎮海中學月考)檢驗飲用水的細菌含量是有效監控疾病發生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關的問題：
(1)要測定飲用水中大腸桿菌的數量，常採用________法，通常將水樣進行一系列的梯度________，然後將上述的水樣用塗布器分別塗布到________的表面進行培養，記錄菌落數量。用該方法統計樣本菌落數時________(填“是”或“否”)需要對照組。原因__________________________。
(2)下圖所示的四種菌落分佈圖中，不可能由上述方法得到的是________。
(3)大腸桿菌培養的條件需無菌，培養基配製時需加入氯化鈉，以維持________。配製培養基時先________(填“調節pH”或“滅菌”)後________(填“調節pH”或“滅菌”)。
4.(2013·全國卷Ⅱ)臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然後按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題：
(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種於固體培養基表面，經過選擇培養、鑑別等步驟獲得。
(2)取該單菌落適當稀釋，用________法接種於固體培養基表面，在37 ℃培養箱中培養24 h，使其均勻生長，佈滿平板。
(3)為了檢測該致病菌對於抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置於該平板上的不同位置，培養一段時間後，含A的濾紙片周圍出現透明圈，說明該致病菌對抗生素A________;含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈，說明該致病菌對抗生素B__________;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明________________________________;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現了一個菌落，在排除雜菌汙染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。
(4)根據上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好選用抗生素________。
5.自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然後進行數量的測定。下面是對大腸桿菌進行數量測定的實驗，請回答有關問題：
實驗步驟：
(1)製備稀釋倍數為102、103、104、105、106的系列稀釋液。
(2)為了得到更加準確的結果，你選用________法接種樣品。
(3)適宜溫度下培養。
結果分析：__________________________________________________________
(1)測定大腸桿菌數目時，在對應稀釋倍數為106的培養基中，得到以下幾種統計結果，正確可信的是__________，其理由___________________________________________
________________________________________________________________________。
A.一個平板，統計的菌落數是230
B.兩個平板，統計的菌落數是220和260，取平均值240
C.三個平板，統計的菌落數分別是210、50和520，取平均值260
D.四個平板，統計的菌落數分別是210、300、240和250，取平均值250
(2)一同學在稀釋倍數為105的培養基中測得平板上菌落數的平均值為234，那麼每毫升樣品中的菌落數是________(塗布平板時所用稀釋液的體積為0.1 mL)。
(3)用這種方法測定的大腸桿菌密度，實際活菌數量要比測得的數量________，因為________________________________________。
6.(2015·湖州中學週考)高溫澱粉酶在大規模工業生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫澱粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。
(1)Ⅰ號培養基從物理狀態來看，屬於固體培養基，配製時要加入________作為凝固劑，從用途來看屬於選擇培養基，因以________作為唯一碳源。
(2)配置固體培養基的基本步驟是( )
A.計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌
B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌
C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板
D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板
(3)溶化時，燒杯中加入瓊脂後要不停地________，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養基滅菌的方法一般為________。
(4)①過程是________，②過程所使用的接種方法是________法。
(5)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養基上生長時可釋放________分解培養基中的澱粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應的菌落，接種到Ⅱ號培養基進一步分離純化後，再對菌種進行________培養。
1.選A 滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。真空包裝、新增防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細菌的蛋白質變性，核酸受破壞，是滅菌方法。
2.選A 微生物培養前，要對培養基進行滅菌;菌落計數法可以測定土壤樣品中的`細菌數目;不同微生物在土壤中含量不同，故分離不同微生物需採用不同的稀釋度;在以尿素作為唯一氮源的培養基上，只有能分解尿素的細菌可以生長。
3.解析：測定飲用水中細菌數目可以採用塗布分離法，塗布前需先稀釋樣品以獲得合適的計數平板，稀釋後的水樣塗布於LB固體培養基上，培養時需同時培養一個未接種的空白培養基作為對照，從而判斷培養基是否已被汙染。題圖中D是經劃線分離後培養所得結果。LB培養基中加入NaCl除作為無機鹽外，還能維持培養基的滲透壓。培養基配製後先調pH值後滅菌才能使用，若先滅菌後調pH值就不能保證調pH值後的培養基無菌。
答案：(1)塗布分離 稀釋 LB固體培養基 是 因為需要判斷培養基使用之前是否被雜菌汙染(培養基滅菌是否合格)
(2)D (3)滲透壓 調節pH 滅菌
4.解析：(1)微生物的常用接種方法為劃線法和稀釋塗布法。(2)能夠使菌落均勻生長、佈滿平板的接種方法為塗布法。(3)含A的濾紙片周圍出現透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感;含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈，說明該致病菌對抗生素B不敏感;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該致病菌對C的敏感性比對A的弱;含D的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出現了一個菌落(排除雜菌汙染)，說明該致病菌可能對抗生素D產生了抗藥性。
答案：(1)劃線 稀釋塗布(或塗布)
(2)塗布 (3)敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性比對A的弱 耐藥菌 (4)A
5.解析：為了得到更加準確的結果，應用稀釋塗布平板法接種樣品。選取多個菌落數相差不大的平板計數，取其平均值。234÷0.1×105=2.34×108。因為菌落可能由兩個或多個細菌連在一起生長而成，所以實際活菌數量要比測得的數量多。
答案：實驗步驟：(2)稀釋塗布平板
結果分析：(1)D 在設計實驗時，一定要塗布至少三個平板作為重複組，才能增強實驗的說服力與準確性;在分析實驗結果時，要考慮所設定的重複組的結果是否相當
(2)2.34×108
(3)多 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落
6.解析：固體培養基通常加入瓊脂作為凝固劑。本實驗的目的是獲得產生高溫澱粉酶的嗜熱菌，故其選擇培養基中應以澱粉作為唯一碳源。配置固體培養基的基本步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。配置培養基時加熱溶化中，要注意加入瓊脂後要不斷攪拌，防止瓊脂糊底和溢位。對培養基的滅菌一般採用高壓蒸汽滅菌。仔細觀察題圖可知，過程①是菌液稀釋，過程②是採用塗布法接種的。能產生澱粉酶的部分細菌能分解利用澱粉，其菌落周圍會出現透明圈，取這樣的菌落再分離純化可獲得相應菌種，以後可以擴大培養用於生產。
答案：(1)瓊脂 澱粉 (2)C (3)攪拌 高壓蒸氣滅菌 (4)稀釋 塗布分離 (5)澱粉酶 擴大
